甘薯属无性繁殖作物,甘薯田间繁殖很易感染病毒,造成产量和品质大幅度下降。据报道脱毒三代与未脱毒的产量差异不显著。而且脱毒薯在田间应用年限越长,单株薯重越轻。通过组培快繁不但提高繁殖系数,而且避免了病毒的感染,保持品种种性。岳薯1号、梅营1号淀粉含量均达20%以上,产量超过45000kg/hm2;紫薯80是一个深受欢迎的、有广阔市场前景的紫色品种。组培快繁对这3个无毒甘薯品种生产具有重要意义。
1 材料与方法
于4—6月份采集岳薯一号、梅营一号、紫薯80无毒甘薯苗茎尖,用自来水冲洗0.5—1.0h。置于超净工作台上用无菌滤纸吸干水分后,用75%酒精浸30s,再用0.1%升汞消毒4min,最后用无菌水冲洗4—5次。剥取0.5mm左右的茎尖生长点,接种于芽诱导培养基(1)MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖4%上,芽萌发后剪下转接于继代增殖培养基(2)MS+BA4mg/L+NAA0.01mg/L+蔗糖4%或(3)MS无激素+蔗糖40%上继代扩繁。剪取0.5—1.0cm带一叶一节茎段接于培养基(3)中培养生根。培养基中均加琼脂0.65%,培养温度25±1℃,光照10—12h/d,强度2000—2500 lx。试管苗生根培养21d后移栽于基质中。
2 生长与分化状况
2.1 芽的诱导
茎尖在芽诱导培养基上培养7d转绿,14d形成愈伤组织并产生芽。28—35d芽高度达1.0—1.5cm。
2.2 增殖培养
剪取诱导产生的芽接于培养基(2)上,接后10d茎基部即产生愈伤组织并开始萌发丛芽,35d产生丛芽3—5个,最大高度达5.4cm。在此培养基增殖培养35d可增殖5—6倍;茎段在培养基(3)上3d即生根,腋芽也开始生长。三周株高平均达5.8cm,具6—8片展开叶,21d继代一次。在此培养基上增殖培养21d繁殖系数可达3—4倍。
2.3 生根培养
剪取0.5—1.0cm带一叶一节茎段接于培养基(3)上,14d生根3—4条,根生长速度较快,根最长达3.6cm,梅营1号根系在前7d里生长稍慢,以后加快。
2.4 移栽
将培养21d的试管苗在自然光下闭瓶炼苗1d,再开瓶炼苗1—3d,然后洗去培养基,栽植于腐殖土与珍珠岩比例4:1的基质中。覆盖薄膜,5d后适当通风,保持土壤湿润,但膜内相对湿度不宜过大,一般控制在85%—90%,移栽苗茎干粗壮,成活率达100%。