溴化乙锭是强诱变剂,并有中度毒性。取用含有这一染料的溶液时务必戴上手套,溶液使用后应按下面介绍的方法之一进行净化处理。
1. 溴化乙锭浓溶液(即浓度>0.5mg/ml 的溴化乙锭溶液)的净化处理
方法一:用沙门氏菌-微粒体测定法表明,本方法可使EB的诱变活性降至原来的1/200 左右。
(1) 加入足量的水使EB的浓度降低至0.5mg/ml以下。
(2) 在所得的溶液中加入0.2体积的新配制的5%次磷酸和0.12体积的新鲜配置的0.5mol/L亚硝酸钠,小心混匀。切记:检测该溶液的pH值应<3.0,市售次磷酸一般为50%溶液,具有腐蚀性,应小心操作,必须在临用前现用现稀释。亚硝酸钠溶液(0.5mol/L)的配法:用水溶解34.5g亚硝酸钠并定容至终体积500ml,现用现配。
(3) 于室温温育24小时后,加入大大过量的1mol/L碳酸氢钠,该溶液可予丢弃。
方法二:用沙门氏菌-微粒体测定法检查,经用本方法处理后,可使EB的诱变活性降低至原来的1/3000左右。但也有报告称,在用净化溶液处理的空白样品中,偶尔有一些仍具有诱变活性。
(1) 加入足量的水使EB的浓度降低至0.5mg/ml 以下。
(2) 加入1倍体积的0.5mol/L KMnO4,小心混合后再加入1倍体积的2.5mol/L HCl,小心混匀,于室温放置数小时。
(3) 加入1倍体积的2.5mol/L NaOH,小心混合后可丢弃该溶液。
2. EB稀溶液(如含有0.5μg/ml EB的电泳缓冲液)的净化处理
方法一
(1) 每100ml溶液中加入2.9g Amberlite XAD-16,这是一种非离子型多聚吸附剂,可向Rohm & Haas公司购置。
(2) 于室温放置12小时,不时摇动。
(3) 用Whatman 1号滤纸过滤溶液,丢弃滤液。
(4) 用塑料袋封装滤纸和Amberlite树脂,作为有害废物予以丢弃。
方法二
(1) 每100ml溶液中加100mg粉状活性炭。
(2) 于室温放置1小时,不时摇动。
(3) 用Whatman 1号滤纸过滤溶液,丢弃滤液。
(4) 用塑料袋封装滤纸和活性炭。
注:用次氯酸(漂白剂)处理EB稀释液并不可取;EB在262℃分解,在标准条件进行焚化后不可能再有危害性;Amberlite XAD-16 或活性炭可用于净化被EB污染的物体表面。