一、仪器安装调试
仪器安装最好外接稳压器,安装安全闸防止突然停电造成难以排除的故障。还要安装铜板地线,这样可使峰谱线稳定。仪器各项技术指标的调试采用18种氨基酸混合标样(日本和光试剂公司H型氨基酸混合标准液)。
1. 基酸分辨率的检测该仪器要求苏一丝氨基酸分辨率为70%以上,甘-丙氨基酸分辨率为80%以上,采用5个标样经检测苏-丝氨基酸分辨率为85%以上,甘一丙氨基酸分辨率为以95%上(试验数据表略)。
2. 氨基酸峰位重现性检测:5个标样连续多次检测,丙氨酸最高和最低出峰保留时间不超过1分钟,精氨酸出峰时间最高和最低偏差在1%以内(试验数据表略)。
3. 氨基酸蜂面积重现性检测:5个标样、经多次检测甘氨酸和丙氨酸峰面积重现性编差平均值均达仪器指标2.5%以下(数据表略)。
4. 仪器重复性检测:仪器分离柱重新装树脂后,对10个标样进行检测,,17种氨基酸(不包括氨峰)的出峰保留时间(t)和峰面积(A)的变异系数(CV)值列表1。
表1看出种17氨基酸值均在以1%内,说明各种氨基酸峰面积再现性较好,仪器重复性好。
二、不同样品氨基酸含里测定
1. 仪器检测原理和方法:该分析仪不锈钢分离柱内装有专利2619混合离子交换树酯(Hitachi Cuiuomion-Exchange Resin),根据离子吸附交换的原理,,样品用6摩尔盐酸水介法处理后,经自动进样器定量,然后进入分离柱,用流量稳定的泵1输送规定的缓冲液,按事先编好的程序卡规定的程序自动淋洗,样品水介后的酸性、中性和碱性氨基酸分别从分离柱上被洗脱下来,各种氨基酸分次与泵2输送的茚三酮显色液在混合器中充分混合,在温度为100℃左右的反应浴中进行显色,生成紫色色素Dikepohydrindlidene Dikerohydrinaomine(DrDA),此紫色发色液经单色分离器的分光光度计,用570 纳米和440 纳米两个注长连续检测,得到的吸光度进行信号放大,记录仪自动绘出各神氨基酸峰谱,以标准氨基酸峰谱为基准,采用峰面极H·W 法进行结果计算,或通过数据处理系统进行计算打印,得出各种氨基酸含量。
2. 分析结果:为了检测仪器的稳定性,选用了各种不同样品20个,进行氨基酸含量的测试,测定数据列表2。
表2 数据是经多次测定的结果,编差均在0.01~0.05以内,而且和其它氨基酸分析仪测定的数据相比较结果基本一致。