使用方法:
1.取样品25g(或mL)放入含有225mL无菌水的玻璃瓶内,经充分振摇做成1:10的稀释液,用1ml灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,注入含有9mL灭菌水的试管内,用1mL灭菌吸管反复吸吹50次做成1:100的稀释液,以此类推,每次换一支吸管。
2.一般食品选3个稀释度进行检测,含菌量少的液体样品(如食用纯水和矿泉水等)可直接用原液检测。将检验纸片水平放台面上,揭开上面的透明薄膜,用灭菌吸管吸取样品原液或稀释液1mL,均匀加到中央的滤纸片上,然后轻轻将上盖膜放下,静置5分钟。 ???? 3.用手指先沿方格区边缘刮一下,防止水外流,然后再在中间轻轻推刮,使水分在纸片方格区内均匀分布,并将气泡赶走。
4.将加了样的检验纸片每15片叠放在一起,放入自封袋中,平放在28℃培养箱内培养48-72小时。
5.霉菌和酵母菌在纸片上生长后会显示蓝色斑点,霉菌菌落显示的斑点略大或有点扩散,酵母菌落则较小而圆滑,许多霉菌在培养后期全呈现其本身特有的颜色。选择菌落数适中(10-100个)的纸片进行计数,乘以稀释倍数后即为每克(或毫升)样品中霉菌和酵母菌的数目。
计数原则及报告方式:
1. 通常选择菌落在10-100个之间的纸片进行计数,乘以稀释倍数报告之(见例1)。 2. 若有两个稀释度的菌落数在10-100个之内,两者的比值小于2,则取其平均数,若大于2,则用值小者(见例2、例3)。 3. 若三个稀释度的菌落数都有在10-100个之内,应选择二个低数值的平均数(见例4)。 4. 若三个稀释度的菌落数均小于10个或大于100个时,应重新试用更低或更高的稀释度进行菌落计数;或采用均小于数量标准的最小值,或采用均大于数量标准的最大值(见例5、例6)。
例次
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稀释度
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两稀释
度之比
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选定计数
稀释度
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报告方式
(个/g或个/mL)
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10-1
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10-2
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10-3
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1
2
3
4
5
6
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158
208
265
98
8
295
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76
68
82
50
5
174
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5
12
50
15
1
106
|
—
1.8
6.1
—
—
—
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10-2
10-2、10-3
10-2
10-1、10-2
10-1
10-3
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7.6×103
9.4×103
8.2×103
3.0×103
8.0×10
1.1×105
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另:揭开上盖膜,用接种针挑取凝胶上的菌落可作进一步的分离和鉴定。使用过的纸片上带有活菌,需及时处理掉。 保存条件:本品需存放在8℃以下冰箱中,保质期为一年,铝箔袋打开后,未用的纸片要放回铝箔袋中封好,放到冰箱中,一个月内用完。
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